Пет сили:
● Инструмент конфигуриран со чекор на екстракција и прочистување на нуклеинска киселина
● Инструмент конфигуриран со модул за екстракција со ултразвук
● Инструментот е конфигуриран со целосно автоматски
● Инструмент конфигуриран со засилување со променлива температура
● Инструментот е конфигуриран со комплетно затворен комплет за реагенси
1. Дали реагенсите за откривање на нуклеинска киселина треба да се екстрахираат и прочистуваат?
Принципот на откривање на нуклеинска киселина е како што следува: под дејство на прајмер, ДНК полимеразата се користи за да се изврши засилување на верижна реакција на шаблонот ДНК/РНК (која бара обратна транскрипција на NA), а потоа се открива количината на ослободен флуоресцентен сигнал за да се утврди дали примерокот содржи нуклеинска киселина (ДНК/РНК) на патогенот што треба да се открие.
1) Примероците кои не се екстрахирани или прочистени може да содржат многу компоненти кои влијаат на конечниот резултат: нуклеаза (која може да ја раствори целната нуклеинска киселина и да предизвика лажно негативни), протеаза (која може да ја намали ДНК полимеразата и да предизвика лажно негативни), тешки метали сол (што доведува до инактивација на синтаза и предизвикува лажно позитивен ), премногу кисел или премногу алкален PH (што може да предизвика неуспех на реакцијата), Нецелосна РНК (што доведува до лажно негативна инсуфициенција на обратна транскрипција).
2) Некои примероци тешко се засилуваат директно: грам-позитивни и некои паразити, поради нивните дебели клеточни ѕидови и други структури, доколку не поминат низ процесот на екстракција и прочистување на нуклеинската киселина, комплетот без екстракција може да не успее за такви примероци.
Затоа, се препорачува да се избере комплет за тестирање или инструмент конфигуриран со чекорот за екстракција на нуклеинска киселина.
2. Хемиска екстракција или физичка екстракција со ултразвучна фрагментација?
Општо земено, хемиската екстракција може да се примени на поголемиот дел од предтретманот и прочистувањето.Меѓутоа, кај грам-позитивните бактерии со дебели ѕидови и некои паразити, исто така е случај дека хемиската екстракција не може да добие ефективни шаблони на нуклеинска киселина, што резултира со лажно негативно откривање.Покрај тоа, хемиската екстракција често користи силни средства, ако елуцијата не е темелна, лесно е да се внесат силни алкали во системот на реакција, што резултира со неточни резултати.
Ултразвучната фрагментација користи физичко дробење, кое успешно го користеше GeneXpert, водечко претпријатие во областа на POCT за човечка употреба, и има апсолутна предност во екстракцијата на нуклеинска киселина на некои сложени примероци (како што е Mycobacterium tuberculosis).
Затоа, се препорачува да изберете комплет за тестирање или инструмент конфигуриран со чекор за екстракција на нуклеинска киселина.а оптимално е доколку има модул за екстракција со ултразвук.
3. Рачно, полуавтоматско и целосно автоматско?
Ова е проблем на трошоците за работна сила и работната ефикасност.Во моментов, болниците за домашни миленици без доволно персонал, а екстракцијата и откривањето на нуклеинска киселина е работа што бара одредени вештини и искуство.Нема сомнение дека целосно автоматската машина за екстракција и детекција на нуклеинска киселина е совршен избор.
4. Засилување на постојана температура или засилување со променлива температура?
Реакцијата на засилување е врска за откривање на нуклеинска киселина, а професионалната технологија вклучена во оваа врска е сложена.Грубо кажано, ензимите се користат за засилување на нуклеинската киселина.Во процесот на засилување, се открива засилениот флуоресцентен сигнал или вградениот флуоресцентен сигнал.Општо земено, колку порано се појави сигналот за флуоресценција, толку е поголема содржината на целниот ген на примерокот.
Засилувањето со постојана температура е засилување на нуклеинска киселина на фиксна температура, додека засилувањето со променлива температура е циклично засилување строго според денатурација-жалење-продолжување.Времето на засилување на константната температура е спроведено, додека променливото температурно засилување е во голема мера под влијание на стапката на пораст и пад на температурата на инструментот (во моментов, многу производители можат да направат 40 циклуси на засилување за околу 30 минути).
Ако лабораториските услови се добри, а зонирањето е строго, разумно е да се каже дека разликата во точноста меѓу двете нема да биде голема.Сепак, засилувањето со променлива температура ќе синтетизира повеќе производи од нуклеинска киселина за релативно пократко време.За лаборатории без строго зонирање и стручен персонал за обука, ризикот од истекување на аеросол на нуклеинска киселина ќе биде поголем, лажното позитивно се јавува откако ќе се случи истекување и што е исклучително тешко да се елиминира.
Дополнително, засилувањето на постојаната температура е исто така посклоно кон неспецифично засилување кога примерокот е сложен (релативната температура на реакцијата е пониска, а колку е повисока температурата на продолжување, толку е подобра специфичноста на врзување на прајмерот).
Што се однесува до сегашната технологија, засилувањето со променлива температура е посигурно.
5. Како да се избегне ризикот од истекување на производи за засилување на нуклеинската киселина?
Во моментов, многу производители избираат ПЦР цевка од типот жлезда како цевка за реакција на нуклеинска киселина, која е запечатена со триење, а температурната денатурација при денатурација на променлива температура при засилување на PCR со променлива температура достигнува 90 степени.
Целзиусови степени .Повторениот процес на експанзија со топлина и контракција со студ е голем предизвик за запечатување на ПЦР цевката, а ПЦР цевката од типот жлезда релативно лесно предизвикува истекување.
Се претпочита реакцијата да се усвои со целосно затворен комплет/цевка за да се избегне истекување на реакциониот производ.Би било совршено ако може да се изработи комплетно затворен комплет за екстракција и детекција на нуклеинска киселина.
Така, новата целосно автоматска машина за екстракција и детекција на нуклеинска киселина на New Tech ги има горенаведените пет оптимални избори.
Време на објавување: август-09-2023 година